人多能干細胞消化液

產(chǎn)品基本信息

產(chǎn)品簡介

人多能干細胞消化液是埃澤思生物科技有限公司（Applied Cell^?）自主研發(fā)的一款不含蛋白消化酶、專業(yè)應用于人多能干細胞消化傳代的產(chǎn)品。本產(chǎn)品為溫和高效型消化液，最大限度減少對干細胞消化損傷，傳代存活率高，且消化時間3-5min即可，和傳統(tǒng)細胞傳代方法相比，簡化細胞傳代過程。本產(chǎn)品生產(chǎn)過程遵循ISO9001體系,并符合GMP指導原則。

產(chǎn)品特性

l 溫和高效，傳代存活率高。

l 簡化細胞傳代過程，省去挑克隆的操作。

相關(guān)產(chǎn)品

人多能干細胞培養(yǎng)基（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001000）

Advance人多能干細胞培養(yǎng)基（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001001）

人多能干細胞分化培養(yǎng)基（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001002）

即用型基質(zhì)膠（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001007）

Serum-Free干細胞凍存液（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001012）

操作方法（此次操作以6孔板為例）

1） 清洗：準備預傳代細胞，貼邊緩慢加入預熱2 mL PBS緩沖液并輕輕晃動，然后沿培養(yǎng)皿邊緣吸去PBS緩沖液。

2） 消化：在6孔板中加入2 mL消化液使之覆蓋皿底，并置于CO₂培養(yǎng)箱中孵育2~5 min；

注意：細胞密度不同，消化時間略有調(diào)整，在顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣以及克隆內(nèi)部細胞間出現(xiàn)間隙，即刻吸掉消化液停止消化。

3）吹打：吸掉人多能干細胞消化液后，立刻加入平衡好的 2mL干細胞培養(yǎng)基，用移液槍呈扇形吹打6孔板底，吹吸次數(shù)保持在3~5次，使皿底貼附的干細胞集落脫落，輕柔緩慢吹吸混勻，制成干細胞懸液，并將其轉(zhuǎn)移到15mL離心管中；

注意：吹打細胞要輕柔，吹打次數(shù)在3~5次為宜，盡量避免形成單細胞。如有少量細胞無法從皿底脫落，屬于正?，F(xiàn)象。如有大量細胞無法從皿底脫落，需延長消化時間。

4）干細胞消化后，可以繼續(xù)進行傳代接種，也可以將干細胞進行凍存，步驟如下：

接種：1000 rpm/min離心3 min，棄上清，用室溫平衡好的干細胞培養(yǎng)基緩吹打重懸細胞5-10次，并轉(zhuǎn)移至包被好的培養(yǎng)板中，每孔2ml培養(yǎng)基。接種后顯微鏡下觀察干細胞密度以及細胞團塊大小，一般4個細胞以上的團塊較合格，水平十字輕輕晃動6孔板，使細胞分布均勻。并置于CO₂恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，第2天觀察細胞貼壁情況，每24h換液一次。

凍存：1000 rpm/min離心3 min，棄上清，加入2mL Serum-Free干細胞凍存液（AC-1001012），重懸3~5次后，將其加入到2mL凍存管中（注意：凍存液即用即拿，及時放回4℃冰箱。）。在凍存管上標記凍存細胞種類、時間、操作者及細胞批次，凍存管置于-80℃冰箱過夜，24h后將其轉(zhuǎn)至于液氮中進行長期保存。

質(zhì)量控制