如何讀懂色譜圖
色譜圖是指樣品流經(jīng)色譜柱分離的各組分在檢測器中形成的檢測信號隨時間分布的信號-時間曲線,也稱為色譜流出曲線。色譜圖的縱坐標(biāo)為檢測器的響應(yīng)信號,橫坐標(biāo)為時間、體積或距離。色譜圖是色譜儀檢測定性定量分析樣品的重要依據(jù),色譜圖顯示的保留時間及峰高可以作為色譜儀實(shí)現(xiàn)定性分析的依據(jù),色譜峰所包羅的峰面積可作為定量分析的依據(jù)。因此,了解色譜圖的各項(xiàng)參數(shù)便可得出準(zhǔn)確有效的檢測結(jié)果。
色譜峰(peak):檢測器對每個組分所給出的信號,在記錄儀上表現(xiàn)為一個個的峰,稱為色譜峰。色譜峰上的極大值是定性分析的依據(jù),而色譜峰所包羅的面積則取決于對應(yīng)組分的含量,故峰面積是定量分析的依據(jù)。正常色譜峰近似于對稱形正態(tài)分布曲線,在檢測過程中,由于操作不當(dāng)會引起色譜儀出峰異常的現(xiàn)象,會出現(xiàn)不對稱峰或是鬼峰現(xiàn)象。
基線(ba
se line):經(jīng)流動相沖洗,柱與流動相達(dá)到平衡后,檢測器測出一段時間的流出曲線。一般應(yīng)平行于時間軸。色譜儀器運(yùn)行時,由于檢測條件的變化,會引起的信號線的位置發(fā)生變化,稱為基線漂移。
噪音(noise):基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。
漂移(drift):基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起,柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產(chǎn)生漂移。
拖尾因子(tailing factor,T):用以衡量色譜峰的對稱性,也稱為對稱因子或不對稱因子?!吨袊幍洹芬?guī)定T應(yīng)為0.95~1.05。T<0.95為前延峰,T>1.05為拖尾峰。
峰底:基線上峰的起點(diǎn)至終點(diǎn)的距離。
峰高(peak height,h):峰的最高點(diǎn)至峰底的距離。
峰寬(peak width,W):峰兩側(cè)拐點(diǎn)處所作兩條切線與基線的兩個交點(diǎn)間的距離。W=4σ
半峰寬(peak width at half-height,Wh/2):峰高一半處的峰寬。Wh/2=2.355σ
標(biāo)準(zhǔn)偏差(standard deviation,σ):正態(tài)分布曲線x=±1時(拐點(diǎn))的峰寬之半。正常峰的拐點(diǎn)在峰高的0.607倍處。標(biāo)準(zhǔn)偏差的大小說明組分在流出色譜柱過程中的分散程度。σ小,分散程度小、極點(diǎn)濃度高、峰形瘦、柱效高;反之,σ大,峰形胖、柱效低。