精子獲能是精子獲得穿透卵子透明帶能力的生理過程,是精子在受精前必須經(jīng)歷的一個(gè)重要階段。獲能的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)是鈣離子通過陽離子通道(CatSper)流入精子內(nèi)部。然而,這種鈣離子穿越過程的分子機(jī)制尚不完全清楚。之前的研究表明,獲能已明確與線粒體耗氧率的增加有關(guān);調(diào)節(jié)鈣進(jìn)入線粒體可提高氧化呼吸的效率。因此,假設(shè)在獲能過程中通過CatSper通道向內(nèi)流入鈣離子會(huì)增加線粒體的鈣濃度和耗氧率,從而提升精子激活和受精能力。
在非獲能(NC)和獲能(CAP)精子中進(jìn)行高分辨率能量代謝測(cè)量(HRR)。如圖顯示了在精子中線粒體的實(shí)時(shí)耗氧率數(shù)據(jù)。CAP的平均呼吸控制比(RCR)(5.8平均±4.8 SD與3.5平均±1.9 SD)和耦合效率(0.56平均±0.20 SD與0.48平均值±0.18 SD)均顯著高于NC精子(下表Table 1),并且備用呼吸能力沒有顯著差異。
通過分析CatSper KO小鼠精子中的HRR,發(fā)現(xiàn)CatSper KO小鼠精子中的呼吸值在NC和CAP條件下沒有差異(下圖)
線粒體在哺乳動(dòng)物的精子功能、質(zhì)量和受精能力中具有怎樣的作用,多年來一直備受爭議。線粒體對(duì)精子生物能量學(xué)的貢獻(xiàn)情況尚不清楚,用于精子活力和激活的ATP的來源長期以來一直存在爭議。在幾個(gè)物種中進(jìn)行的研究提供了不同的或者相互矛盾的結(jié)果。在小鼠精子中,糖酵解產(chǎn)生的ATP足以維持進(jìn)行性運(yùn)動(dòng)。相反,在人類精子中,線粒體功能與精子活力或整體質(zhì)量之間存在很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性。因此,有一種觀點(diǎn)認(rèn)為精子具有多功能的新陳代謝,可能與物種、環(huán)境的不同具有不同的能量機(jī)制。
本文通過高精度能量代謝檢測(cè)方法測(cè)量了NC和CAP小鼠精子中的線粒體活性。首先,測(cè)量完整和活動(dòng)精子細(xì)胞中的線粒體耗氧率,在獲能過程中,CAP精子的線粒體偶聯(lián)效率提高,表明線粒體電子傳遞鏈與ADP磷酸化過程比NC精子更緊密地耦合。其次,我們注意到CAP精子中RCR的增加,表明線粒體功能改善以增加ATP的產(chǎn)生。然而,CAP精子的儲(chǔ)備呼吸能力(反映精子對(duì)能量需求的反應(yīng)能力)并未改變,這表明精子的運(yùn)作接近其生物能量極限。
與早期關(guān)于線粒體在精子獲能中的作用的研究相比,該工作具有顯著優(yōu)勢(shì)。該研究是在完整和活動(dòng)精子中進(jìn)行的,而早期的研究使用了非生理條件(透化和/或非活動(dòng)精子)。
參考文章:Ferreira J J , Cassina A , Irigoyen P , et al. Increased mitochondrial activity upon CatSper channel activation is required for sperm capacitation.[J]. Redox biology, 2021, 48:102176.
1、獨(dú)有的光電聯(lián)合多參數(shù)實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)技術(shù):
電化學(xué)實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)模塊:pO2(高分辨率極譜氧電極傳感器,耗氧率檢測(cè)分辨率為±1 pmol O??s-1?mL-1)、pH、H2O2、TPP+(測(cè)量線粒體膜電位)、H2S、NO、質(zhì)體醌;
熒光實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)模塊:MMP(測(cè)量線粒體膜電位)、ATP、Ca2+、ROS、NADH;
2、獨(dú)有的原代細(xì)胞、原代組織能量代謝快速檢測(cè)技術(shù):
無需過夜培養(yǎng)、樣品快速檢測(cè),更加客觀反映樣品更接近體內(nèi)的能量代謝水平;
3、獨(dú)有的多維度能量代謝分析平臺(tái):
適應(yīng)線粒體、細(xì)胞、組織塊、活檢樣品等不同層次不同水平的樣本檢測(cè)。