泰克生物是由一群深耕于抗體藥物發(fā)現(xiàn)方面的專(zhuān)家組成的團(tuán)隊(duì)，平均項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)超過(guò)10年，建立了完善的基于噬菌體展示技術(shù)平臺(tái)的抗體藥物候選分子發(fā)現(xiàn)平臺(tái)，能夠?yàn)榭蛻?hù)提供一系列跟治療性生物大分子發(fā)現(xiàn)相關(guān)的服務(wù)，包括但不限于VHH抗體、scFv抗體和Fab抗體發(fā)現(xiàn)，CAR-T先導(dǎo)抗體序列設(shè)計(jì)，CAR-NK先導(dǎo)抗體序列設(shè)計(jì)等服務(wù)。經(jīng)過(guò)10年左右的發(fā)展，泰克生物在抗體噬菌體展示技術(shù)平臺(tái)的基礎(chǔ)上，引入了單B細(xì)胞測(cè)序技術(shù)，能夠更加快速的為客戶(hù)提供高質(zhì)量抗體先導(dǎo)序列的發(fā)現(xiàn)服務(wù)。

CAR-T療法是指嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法，英文全稱(chēng)Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy（CAR-NK類(lèi)似，只是將T細(xì)胞更換成NK細(xì)胞）。這是一種治療腫瘤的新型精準(zhǔn)靶向療法，近幾年通過(guò)優(yōu)化改良在臨床腫瘤治療上取得很好的效果，是一種非常有前景的，能夠精準(zhǔn)、快速、高效，且有可能治愈癌癥的新型腫瘤免疫治療方法。

T細(xì)胞也叫T淋巴細(xì)胞，是人體白細(xì)胞的一種，來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞，在胸腺中成熟，然后移居到人體血液、淋巴和周?chē)M織器官，發(fā)揮免疫功能。技術(shù)人員通過(guò)基因工程技術(shù)，將VHH抗體基因，scFv抗體基因通過(guò)合適的方法，如慢病毒包裝方式轉(zhuǎn)入到T細(xì)胞中，通過(guò)VHH或scFv的膜定位表達(dá)，即給T或NK細(xì)胞定制了一套特殊的針對(duì)特異性腫瘤的定位導(dǎo)航裝置CAR（腫瘤嵌合抗原受體），即CAR-T細(xì)胞，利用其“定位導(dǎo)航裝置”CAR，專(zhuān)門(mén)識(shí)別體內(nèi)腫瘤細(xì)胞，并通過(guò)免疫作用釋放大量的多種效應(yīng)因子，從而高效地殺滅腫瘤細(xì)胞，達(dá)到治療惡性腫瘤的目的。

相比于傳統(tǒng)scFv抗體（來(lái)自普通的IgG抗體），來(lái)自駝源動(dòng)物的VHH抗體（又稱(chēng)為重鏈抗體）分子量約為15kDa，具有更強(qiáng)的穩(wěn)定性，現(xiàn)在被廣泛的應(yīng)用于CAR-T的先導(dǎo)抗體開(kāi)發(fā)。泰克生物通過(guò)自有羊駝基地，能為客戶(hù)提供背景純凈，來(lái)源清晰的健康羊駝進(jìn)行納米抗體（VHH抗體）發(fā)現(xiàn)服務(wù)。

█ 羊駝VHH抗體

羊駝抗體只具有重鏈不含輕鏈，因此被稱(chēng)為重鏈抗體（heavy Chain Antibody，hcAb），如圖1中D所示，羊駝抗體缺少輕鏈，由4個(gè)HC和2個(gè)VH組成，其中VH區(qū)域又被稱(chēng)為納米抗體或單域抗體（single domain antibody，sdAb）。獨(dú)立的羊駝VH區(qū)域具有完整的抗原結(jié)合能力，同時(shí)不像人工改造的單鏈抗體片段(single chain Fv，scFv)，容易聚集。和傳統(tǒng)抗體相比，羊駝抗體具有穩(wěn)定的性質(zhì)，例如在60℃仍能保持活性，抵抗極端的pH環(huán)境。

目前泰克生物成功建立了來(lái)自300只羊駝的天然噬菌體抗體展示文庫(kù)，有效庫(kù)容量達(dá)到10¹⁰，通過(guò)該文庫(kù)的篩選，能夠縮短羊駝單抗的制備周期。同時(shí)，采用不同的篩選策略，如抗原遞減法，結(jié)合我司的蛋白重組表達(dá)平臺(tái)，能夠?yàn)榭蛻?hù)提供達(dá)-5g/L水平的重組抗體表達(dá)發(fā)酵服務(wù)，在很大程度上提高了抗體批間一致性和穩(wěn)定性。

圖1 A，傳統(tǒng)IgG；B，傳統(tǒng)抗體Fab片段；C，傳統(tǒng)抗體的單鏈scFv片段；D，重鏈抗體或駝?lì)惪贵w；E，駝?lì)惪贵w的VH區(qū)域或單域抗體（sdAb）

█ 制備流程

圖2 基于噬菌體技術(shù)平臺(tái)的駝源VHH抗體發(fā)現(xiàn)服務(wù)

█ 服務(wù)內(nèi)容 

█ CAR-T 細(xì)胞療法的研發(fā)流程

圖3 泰克生物CAR-T/NK項(xiàng)目服務(wù)流程

針對(duì)CAR-T/NK我們能夠提供的額外增值服務(wù)：

(1) CAR表達(dá)測(cè)試

(2) 靶點(diǎn)蛋白與先導(dǎo)抗體抗原識(shí)別區(qū)專(zhuān)屬性

(3) 針對(duì)先導(dǎo)抗體抗原識(shí)別區(qū)的抗獨(dú)特性（Anti-idiotype）測(cè)試

(4) 針對(duì)不同靶點(diǎn)蛋白的Fab形式抗體抗原識(shí)別區(qū)檢測(cè)

(5) 細(xì)胞因子釋放試驗(yàn)

a) 細(xì)胞因子種類(lèi)：?鏈共受體家族、IL-12家族、IL-1超家族等

b) 方法：酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)（ELISpot）、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色試驗(yàn)（ICS）、流式細(xì)胞術(shù)等

(6) 體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)

泰克生物能夠提供體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)，以驗(yàn)證評(píng)估CAR-T細(xì)胞的細(xì)胞毒性和可能的不良反應(yīng)。例如，CAR-T細(xì)胞療法可能會(huì)引起的一些急性的靶向/腫瘤毒性（細(xì)胞因子釋放綜合征、腫瘤溶解綜合征）或靶向/非腫瘤毒性，以及由于CAR-T細(xì)胞經(jīng)歷抗原-獨(dú)立增殖可能會(huì)增加細(xì)胞介導(dǎo)的毒性而導(dǎo)致的CAR-T細(xì)胞永生失敗。

(7) CAR細(xì)胞增殖試驗(yàn)

泰克生物開(kāi)發(fā)的第二代和第三代CAR產(chǎn)品，能夠增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞或NK細(xì)胞增殖的持久性，并且泰克生物能夠通過(guò)不同的測(cè)定方法對(duì)這種活化和增殖過(guò)程進(jìn)行評(píng)估，例如 MTT、MTS、細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8 (CCK-8)、5,6-羧基熒光素二乙酸琥珀酰亞胺酯 (CFSE) 結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)分析等技術(shù)。

(8) 活力和生物分布分析

泰克生物能夠提供活力和生物分布分析，以驗(yàn)證評(píng)估CAR-T細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的正常增殖能力，為 CAR-T細(xì)胞療法提供臨床前服務(wù)。例如，針對(duì)CAR-T細(xì)胞有限的復(fù)制壽命而導(dǎo)致的療效減弱的CAR-T細(xì)胞療法障礙，活力和生物分布分析為CAR-T細(xì)胞的長(zhǎng)期治療效果評(píng)估提供重要支持。

█ 服務(wù)優(yōu)勢(shì)

?采用成熟的羊駝免疫程序結(jié)合噬菌體展示技術(shù)，構(gòu)建駝源免疫抗體庫(kù)，篩選得到高親和力和特異性的單克隆抗體

? 豐富的經(jīng)驗(yàn)積累，成熟的技術(shù)路線，保證產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠

? 嚴(yán)格的質(zhì)控體系：標(biāo)準(zhǔn)硬件設(shè)施平臺(tái)，滿足cGMP的文件關(guān)鍵管理規(guī)則，可提供手寫(xiě)實(shí)驗(yàn)記錄本

?能克服傳統(tǒng)方法難以解決的靶點(diǎn)、副作用大等問(wèn)題，是理想的抗體藥制備來(lái)源

? 提供單克隆抗體大規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)，滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求

? 完整的上下游服務(wù)：提供從抗原制備、噬菌體文庫(kù)構(gòu)建羊駝免疫、抗體篩選到抗體人源化等一體化服務(wù)

? 服務(wù)可定制：根據(jù)客戶(hù)需求制備，為每一個(gè)客戶(hù)量身定制實(shí)驗(yàn)方案，滿足每一位客戶(hù)的特殊需求