SILAC是細胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標記技術(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture, SILAC)的簡稱。SILAC實驗流程是：細胞培養(yǎng)基中加入輕、中或重型穩(wěn)定同位素標記的必需氨基酸賴氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)，在細胞生長過程中使新合成的蛋白會帶上穩(wěn)定同位素標簽。等量混合各類型蛋白質(zhì),酶解后進行質(zhì)譜分析。通過比較一級質(zhì)譜圖中不帶標記/帶同位素標記質(zhì)譜峰型的面積大小進行相對定量，同時二級譜圖對肽段進行序列測定從而進行蛋白鑒定。與SILAC類似，二甲基Dimethyl標記也是一種同位素蛋白標記的方法。Dimethyl是一種小分子同位素化學標記物，通過化學標記的方法標記細胞裂解后的蛋白或多肽的N端或者賴氨酸的ε氨基基團，使蛋白／多肽標記上不同的Dimethyl標簽。除了標記方法的差別外，SILAC/Dimethyl兩種標記的質(zhì)譜分析方法基本一致，而且具有相近的分析精度和廣度，在定量蛋白組學分析研究中受到越來越廣泛的運用。

百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，推出基于SILAC/Dimethyl的定量蛋白組分析服務技術包裹，您只需要將您的實驗目的告訴我們并將您的細胞寄給我們，我們會負責項目后續(xù)所有事宜，包括細胞培養(yǎng)、細胞標記、蛋白提取、蛋白酶切、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學分析。

SILAC定量蛋白組學實驗流程

關于樣品

1.您只需使用干冰將凍存細胞寄給我們即可，同時保證細胞具有可以傳代培養(yǎng)5次以上的能力；

2.如果您需要自己標記細胞并完成細胞的刺激等處理過程，您只需要將標記完成并且經(jīng)過處理的細胞樣品或者蛋白樣品干冰寄給我們即可；對于每個樣品，需要保證含有50-100ug蛋白。

Silac與Dimethyl標記法對比

總的來說，SILAC的重復性比Dimethyl稍高一些，因為不同的SILAC樣品在蛋白酶切之前就已經(jīng)混合在一起，而Dimethyl標記的是酶切后的多肽片段，受到體系穩(wěn)定性影響更多，因此重復性稍遜于SILAC。但是Dimethyl作為一種優(yōu)質(zhì)價廉的標記手段也得到越來越廣泛的應用。

中/英文項目報告

在技術報告中，百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括：

1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關的質(zhì)譜參數(shù)（中英文）
3. 鑒定的磷酸化位點的詳細信息
4. 質(zhì)譜圖片
5. 原始數(shù)據(jù)

SILAC/Dimethyl定量蛋白組學一站式服務

您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務完成：樣品處理-上機分析-數(shù)據(jù)分析-項目報告

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