產(chǎn)品名稱：Tonescript One Step SYBR qRT-PCR kit

英文名稱：Tonescript One Step SYBR qRT-PCR kit

產(chǎn)品編號：TK08045

產(chǎn)品規(guī)格：50 µl反應(yīng)× 100次

儲存條件及有效期：試劑盒于-20℃避光保存，有效期12個月。

產(chǎn)品描述：

本試劑盒是采用SYBR Green I嵌合熒光法進(jìn)行One Step qRT-PCR的專用試劑。使用本試劑盒進(jìn)行qRT-PCR反應(yīng)可在同一反應(yīng)管內(nèi)連續(xù)進(jìn)行，操作簡單，并能有效防止污染。本反應(yīng)體系由于可以對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行實(shí)時檢測，大大提高了檢測的靈敏度，并省略了PCR反應(yīng)后電泳的步驟，非常適合微量RNA的檢測。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

本產(chǎn)品中使用了最適合于qRT-PCR的反轉(zhuǎn)錄酶Tonescript RTase和抗體修飾的具有高效擴(kuò)增效率的Hot Start Taq Polymerase，能進(jìn)行穩(wěn)定的One Step qRT-PCR反應(yīng)，可以快速、準(zhǔn)確地對RNA病毒等微量RNA進(jìn)行分析。本品可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量檢測，重復(fù)性好，可信度高。

準(zhǔn)備材料：

實(shí)時熒光定量PCR儀、RNA模板、PCR引物、移液器槍頭。

注意事項(xiàng)：

1、根據(jù)不同的熒光定量PCR系統(tǒng)來決定ROX Reference Dye的使用。

2、當(dāng)有多個樣品進(jìn)行反應(yīng)時，應(yīng)先配制各種試劑的混合液，然后再分裝到每個反應(yīng)管中，可使所取試劑體積準(zhǔn)確，避免同一試劑多次吸取造成浪費(fèi)，同時也減少每個樣品之間的誤差。

3、使用Tonescript One Step Enzyme Mix時應(yīng)輕輕混勻，避免起泡，吸取應(yīng)請短暫離心，將試劑收集到管底部，同時由于含有甘油，所以應(yīng)緩慢吸取，并且槍頭不宜插入液面過深，造成損失。

4、2×One Step SYBR qRT-PCR buffer溶解后要充分混合，使用Vortex等振蕩完全溶解后使用。

5、本制品中使用的 Hot Start Taq Polymerase是用Taq抗體修飾的 Hot Start 高效DNA聚合酶，與化學(xué)修飾型的 Hot Start DNA聚合酶相比，不需要PCR反應(yīng)前的95℃，5-10 min的預(yù)變性，高溫處理時間過長，會使酶的活性下降，其PCR擴(kuò)增效率和定量準(zhǔn)確度都會受到影響。

6、本產(chǎn)品只能用基因特異反轉(zhuǎn)錄引物，不能使用Random Primer和Oligo dT Primer等進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

RNA模板制備注意事項(xiàng)

RNA模板可以采用總RNA或mRNA。本試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，然后對cDNA進(jìn)行擴(kuò)增，RNA的純度會影響cDNA的合成量，制備RNA的關(guān)鍵是要抑制細(xì)胞中和環(huán)境中的RNase，防止RNA降解。因此，在實(shí)驗(yàn)中戴一次性手套，使用RNA專用實(shí)驗(yàn)臺，實(shí)驗(yàn)中避免講話等。相關(guān)實(shí)驗(yàn)耗材應(yīng)用0.1%DEPC（焦碳酸二乙酯）水溶液在37℃處理12 h，并高壓滅菌30 min后使用。

同科生物簡介：成立于2007年，是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售和技術(shù)服務(wù)于一體專注于生命醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè)。主營業(yè)務(wù)有科研產(chǎn)品、診斷試劑、分子診斷和技術(shù)服務(wù)等，主要服務(wù)于科研機(jī)構(gòu)、大專院校、醫(yī)院和工業(yè)等客戶。

生產(chǎn)科研：同科生物搭建多個研發(fā)與合作技術(shù)平臺（博士后實(shí)踐基地、院士工作站、同濟(jì)大學(xué)人才培養(yǎng)與產(chǎn)學(xué)研合作基地及生物研究中心等），為技術(shù)創(chuàng)新提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)保障。擁有三類體外試劑生產(chǎn)中心、儀器生產(chǎn)中心、研發(fā)質(zhì)檢實(shí)驗(yàn)室等、廠房和實(shí)驗(yàn)面積達(dá)8000多平米，儀器設(shè)備設(shè)施先進(jìn)齊全（包括定量PCR儀、生物安全柜、核酸蛋白測定儀、高壓細(xì)胞破碎儀、FPLC等系列高端精密儀器設(shè)備）。

研發(fā)團(tuán)隊(duì)：同科擁有一支由中科院院士為顧問，國家千人為首席科學(xué)家，以博士碩士為主體的高效的國際化研發(fā)團(tuán)隊(duì)。研發(fā)人員專業(yè)涵蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)、藥物制劑、生物技術(shù)、遺傳學(xué)、微生物學(xué)、生物工程領(lǐng)域，關(guān)聯(lián)性較大，專業(yè)結(jié)構(gòu)合理，且形成互補(bǔ)，在重大項(xiàng)目及關(guān)鍵技術(shù)上具備卓越的攻關(guān)能力。

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