詳細(xì)說(shuō)明
上海卓康以質(zhì)量為本,樹立“卓康質(zhì)量”是公司的發(fā)展目標(biāo)。我們一直加倍努力,竭盡全力做到不辜負(fù)您的支持與信賴。同時(shí)公司也離不開(kāi)廣大客戶的幫助支持,真誠(chéng)邀請(qǐng)國(guó)內(nèi)外有實(shí)力的實(shí)驗(yàn)室、生物技術(shù)公司合作,共同發(fā)展。
目前卓康提供的服務(wù)范圍包括:生物合成siRNA、shRNA的制備;轉(zhuǎn)錄編碼shRNA的DNAs、轉(zhuǎn)錄編碼shRNA的質(zhì)粒載體訂購(gòu);siRNA靶位的設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)選擇分析;siRNA相關(guān)試劑和RNA技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品的代理銷售;重組病毒構(gòu)建包裝;基因蛋白表達(dá)、載體構(gòu)建、多克隆抗體和單克隆抗體制備;多種細(xì)胞學(xué)服務(wù);常用的分子生物學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)耗材銷售等。
卓康在分子生物學(xué)和免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),特別抗體制備技術(shù)方面同樣具有豐富經(jīng)驗(yàn),提供快速、優(yōu)質(zhì)、性價(jià)比高的實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
十三、代做實(shí)驗(yàn)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)服務(wù)
1、檢測(cè)指標(biāo):
1)DNA倍體分析、DNA含量分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡。
2)細(xì)胞表面抗原分析:淋巴細(xì)胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相關(guān)抗體分析、HLA-B27、PNH相關(guān)抗原檢測(cè)(CD55/CD59)、胞內(nèi)細(xì)胞因子檢測(cè)等。
3) 其它指標(biāo):細(xì)胞內(nèi)鈣離子測(cè)定、耐藥基因檢測(cè)(p170、MRP、LRP)及凋亡基因(P53、CD95、c-erb B2、Bcl-2及Bax等。
2、樣本及來(lái)源:
1) 單個(gè)細(xì)胞:1~2×106 個(gè)細(xì)胞左右;來(lái)源于人、小鼠、大鼠或其它。
2) 外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;來(lái)源于人、小鼠、大鼠或其它。
3、收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):
編號(hào) 規(guī)格 價(jià)格(¥)
FWO-1 單色標(biāo)記 50/T
FWO-2 雙色標(biāo)記 70/T
FWO-3 三色標(biāo)記 90/T
說(shuō)明:
1、 實(shí)驗(yàn)所用的流式細(xì)胞儀為COULTER EPICS XL。
2、 送檢樣本量:
1)單個(gè)細(xì)胞:1~2×106 個(gè)細(xì)胞左右;來(lái)源于人、小鼠、大鼠或其它。
2)外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;來(lái)源于人、小鼠、大鼠或其它。
3、 用戶需要進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)須提前預(yù)約,同時(shí)說(shuō)明實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、方法等。一次送檢標(biāo)本數(shù)不少于10個(gè)。如果一次送檢標(biāo)本總數(shù)不足10個(gè),每個(gè)測(cè)試費(fèi)用為標(biāo)準(zhǔn)收費(fèi)×2。
4、 我公司在正式接受實(shí)驗(yàn)委托一周內(nèi)交付實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所提供實(shí)驗(yàn)結(jié)果忠實(shí)于樣本的實(shí)際情況。
5、 用戶須一次性全額預(yù)付實(shí)驗(yàn)費(fèi)。
6、 部分常用熒光探針,如PI等,我公司可免費(fèi)提供,;特殊標(biāo)記物,如CD抗體等,用戶須另行購(gòu)買,也可委托我公司代購(gòu);用戶所提供抗體應(yīng)可與樣本發(fā)生特異性識(shí)別反應(yīng)。
7、 由用戶提供的樣品或試劑所致的實(shí)驗(yàn)問(wèn)題由用戶負(fù)責(zé)。
8、 請(qǐng)?jiān)诒碇姓f(shuō)明檢測(cè)具體要求(可另附頁(yè)),由于填寫資料不詳所致任何問(wèn)題由用戶負(fù)責(zé)。
9、 請(qǐng)?jiān)谒蜆拥耐瑫r(shí)提供樣本來(lái)源及處理方法等信息,樣品檢測(cè)后原則上本公司不負(fù)責(zé)保存。
附:流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品推薦制備方法:
A. 直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體):
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
注:本方法僅供參考,如有其它要求,請(qǐng)?jiān)谒蜆忧罢f(shuō)明。
上海卓康生物科技有限公司
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