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本產(chǎn)品可克服Taq DNA Polymerase的抑制因子如血紅素、腐植酸、染料等的影響，并可提高PCR的擴增效率。對大多數(shù)檢材均可直接進行擴增，不但檢材用量少，還可省去提取DNA的煩瑣操作，并大大減少了污染機會。
一、 試劑盒成分（200次，25μl反應體積/次）
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成 分prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" |
描 述 |
體 積 |
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5X PCR Reaction Mix |
5×濃縮液，在緩沖液中含有MgCl2，dNTP等 |
1.1ml×1管 |
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5X PCRboost |
5×濃縮液，可克服PCR抑制因子，增強擴增效果。 |
1.1ml×1管 |
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HS-Taq DNA Polymerase |
5 U/μl |
120μl×1管 |
二、DNA制備本系列產(chǎn)品對幾乎對所有生物的有核細胞檢材均可放入PCR擴增管中直接進行擴增，如1mm 直徑左右?guī)в醒?、精液、或唾液等有核細胞的紙品或布料等固相檢材；帶有毛囊細胞的毛發(fā)一根；0.2ul左右的血液、精液、唾液等液體檢材。有核細胞較少的尿液或胎兒羊水等液體檢材，可先離心去掉部份上清后再混勻，取0.2ul左右的混合液直接放入PCR擴增管中進行擴增。
三、PCR擴增1、PCR反應混合物的配制：將以下試劑震蕩混勻5 秒鐘后短暫離心，25μl反應體積按以下比例混合 ：
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5X PCR Reaction Mix |
5 μl |
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5X PCRboost |
5 μl |
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Primer Set |
適量 |
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HS-Taq DNA Polymerase（5 U/μl） |
0.5 μl |
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樣品DNA |
詳見第二項 |
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ddH2O |
加至 25 μl |
2、PCR反應：本試劑盒的PCR 反應條件是在ABI 9700 型PCR 熱循環(huán)儀上建立的。循環(huán)參數(shù)為：
prefix = st1 ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags" 95℃ 7minutes ＋ (94 ℃ 30 seconds＋61 ℃ 1minute ＋ 70 ℃ 1minute) × 5＋（92 ℃ 30 seconds＋ 61 ℃1minute ＋70 ℃ 1minute）× 25＋ 60 ℃ 45minutes ＋ 12℃ soak。