一、高效液相色譜儀的特點及應(yīng)用范圍
高效液相色譜儀是在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上，引入了氣相色譜的理論，在技術(shù)上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器，因而具備速度快、效率高、靈敏度高、操作自動化的特點。
1.分離效率高：使用新型填充物,粒度可小于50微米,每米色譜柱的塔板數(shù)達(dá)5000以上。
2.分離速度快：采用高壓輸液泵，流動相壓力高達(dá)300千克力/厘米2以上,流速遠(yuǎn)比經(jīng)典液 相色譜法為快，分離速度可與氣相色譜法相比。
3.靈敏度高：流出液流經(jīng)紫外或熒光等檢測器，可直接檢出低至10-13～10-10克的物質(zhì)。
4.應(yīng)用范圍廣：可以測定高沸點、熱不穩(wěn)定等不宜于用氣相色譜法測定的大分子量的化合物。環(huán)境中的一些致癌物質(zhì)如黃曲霉毒素、多環(huán)芳烴以及除莠劑、殺蟲劑等都可以用高效液相色譜法進(jìn)行快速、靈敏的分析測定。大氣飄塵的多環(huán)芳烴從兩環(huán)的萘至五環(huán)的苯并(a)芘等10多種化合物，在半小時內(nèi)便可分離測定。應(yīng)用紫外檢測器可以檢知含量為纖克／米3級的多環(huán)芳烴。
正是因為高效液相色譜法具有如此多的優(yōu)點，所以又被稱為現(xiàn)代液相色譜法、高雅液相色譜法、高速液相色譜法。
 

二、液相色譜實例：磺胺分析（藥物分析）高效液相色譜儀
樣  品：磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基異噁唑和甲氧芐氨嘧啶的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，740色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)
檢測器：UV 481型紫外檢測器，波長240nm
色譜柱：μ-Bondapak C18 , 5μm，柱長25 cm，柱徑4.6 mm
流動相：由KH2PO4（0.05mol/L）和Na2HPO4(0.05 mol/L)以及MeOH所組成，其用量比例為200:10:165，
流  速：1mL/min
進(jìn)  樣：10μL
結(jié)  果：所有組分在6min之內(nèi)全部流出，各組分完全分離，組分出峰順序為：磺胺保留時間為2.60 min, 磺胺嘧啶保留時間為3.18 min、磺胺甲基異噁唑保留時間為4.33 min,甲氧芐氨嘧啶保留時間為5.19min。