Human Domain Antibody Library (DAb library)
關(guān)鍵詞:DAb library; 噬菌體展示; SCFV;人造文庫(kù)
Human Domain Antibody Library源自MRC Daniel Christ實(shí)驗(yàn)室, Human Domain Antibody Library明顯優(yōu)于Tomlinson I + J 文庫(kù),可以通過(guò)噬菌體展示技術(shù)產(chǎn)生針對(duì)任何目的抗原的抗體。該類抗體可用于ELISA, Western blotting, FACS, IHC等免疫學(xué)試驗(yàn)。該噬菌體文庫(kù)已經(jīng)在很多分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室成功使用,可在大量不同的蛋白,多肽,小分子復(fù)合物中誘導(dǎo)出特異性抗體反應(yīng)物。
噬菌體展示技術(shù)利用基因克隆技術(shù)將B細(xì)胞全套可變區(qū)基因克隆出來(lái),組裝到表達(dá)載體內(nèi)并表達(dá)到噬菌體表面,并通過(guò)“吸附-洗脫-擴(kuò)增”的富集過(guò)程,從中篩選特異性抗體的可變區(qū)基因。Human Domain Antibody構(gòu)建在pR2(MYC VSV 標(biāo)簽)上,多元化的側(cè)鏈在 CDR1、CDR2 和 CDR 3:H27 33、H35、H50、H52 H54、H94、H95-H100(a-k)、H101、H102。經(jīng)過(guò)篩選后與突變的多樣性體細(xì)胞共同作用使其成熟。該文庫(kù)基于VH框架(V3-23/D47),抗原結(jié)合區(qū)域的多樣性的引入通過(guò)PCR突變CDR1、CDR2和CDR3。此文庫(kù)有以下優(yōu)點(diǎn):
• 產(chǎn)生結(jié)合劑到模型折疊抗原上,無(wú)冷卻后抗原結(jié)合活性的重大損失。
• 抗體選擇后,通過(guò)25次熱變形循環(huán),競(jìng)爭(zhēng)抗耐性的嗜熱蛋白如Taq酶,保持抗原結(jié)合活性。
• 在噬菌體中,所有組分可經(jīng)受熱誘導(dǎo)聚集反應(yīng)。
以上提到的優(yōu)點(diǎn),可為診斷和治療的研究與應(yīng)用提供廣泛領(lǐng)域,可以進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)最大化結(jié)合你感興趣的抗原數(shù)量。
文庫(kù)以下面形式提供:
• Phagemid antibody library (~3x10 9 )
• Helper phage KM13
• Host strain TG1Tr
• Optimised antibody
• Controls: anti-beta-galactosidase & anti-bovine ubiquitin antibodies
• Detailed protocol
Source Bioscience (Geneservice)與全球多個(gè)科研機(jī)構(gòu)(如NIH、NKI、Sanger等)建立合作關(guān)系,擁有全球最大的cDNA、基因組、噬菌體展示、microRNA、siRNA、shRNA與MGC收藏庫(kù),涉及物種包括人、小鼠、大鼠、牛,以及各種模式動(dòng)物如線蟲(chóng)、斑馬魚、果蠅、原雞、爪蟾等,產(chǎn)品達(dá)1600多萬(wàn)種。Human Domain Antibody Library是Source Bioscience提供的較為成熟的一個(gè)文庫(kù),除此之外,還有Tomlinson I + J 文庫(kù),以及ATLAS scFV library。
更多產(chǎn)品可點(diǎn)擊 Source Bioscience查詢具體信息。
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