1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基+增補(bǔ)劑 S1:取瓶內(nèi)干粉 44.7 g 溶于 1000 mL 去離子水的潔凈三角瓶中,然后加入增補(bǔ)劑 S1 2.0g,充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照44.7 g/L 和2.0g/L 的比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。121℃高壓滅菌15min。
2、增補(bǔ)劑 S2:取增補(bǔ)劑 S2 0.25g 溶于 10ml 去離子水中,(也可按照 0.25g/l的比例擴(kuò)大或縮小制備增補(bǔ)劑的量),用磁力攪拌器快速攪拌均勻,使其完全溶解。
3、將溶解好的增補(bǔ)劑 S2 過濾除菌后,加入到冷卻至 45℃~50℃的上述培養(yǎng)基內(nèi),輕輕混勻,傾注平皿,使其凝固,晾干備用。晾干的平板為灰色半透明固態(tài)。
保存: 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存 2 個(gè)月(2℃~8℃,避光)。
性能及局限
在二氧化碳環(huán)境中培養(yǎng)可能導(dǎo)致假陽性。極少數(shù) B 群鏈球菌可能需要另外延長 24 小時(shí)培養(yǎng)時(shí)間才能出現(xiàn)淡紫色菌落。一些氣單胞菌可能出現(xiàn)淡紫色菌落。一些 C、F、G 群鏈球菌可能呈現(xiàn)紫色菌落。大多數(shù)的 A 群鏈球菌為紫色菌落, 出現(xiàn)假陽性結(jié)果,需做 PYR(吡咯烷酮芳基酰胺酶)進(jìn)行鑒定,PYR(+):A 群鏈球菌,PYR(-):B 群鏈球菌。一些較為罕見的葡萄球菌可能出現(xiàn)紫色菌落,可通過過氧化氫酶試驗(yàn)區(qū)分,過氧化氫酶陽性為 B 群鏈球菌,過氧化氫酶陰性為葡萄球菌。最終鑒定需要補(bǔ)充做生化試驗(yàn)或免疫學(xué)試驗(yàn)。