隨著我國經(jīng)濟的快速發(fā)展和人民生活水平的迅速提高，食品安全快速檢測技術(shù)逐步受到重視，涌現(xiàn)出了不少新的技術(shù)和產(chǎn)品，到目前已有五十多種。蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測作為最早開發(fā)的項目，其技術(shù)和產(chǎn)品也最為成熟，成為食品安全檢測的必檢項目。
經(jīng)過二十年的不懈努力，為我國農(nóng)殘快速檢測作出了重要的貢獻。2001年農(nóng)業(yè)部發(fā)布了蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 448-2001），接著衛(wèi)生部又頒布了蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測國家標(biāo)準(zhǔn)方法（GB/T 5009.199-2003），這兩個標(biāo)準(zhǔn)都采用了基于昆蟲毒理學(xué)之膽堿酯酶抑制原理而建立起來的酶抑制率法（分光光度法），我們不但提供了成熟的技術(shù)和產(chǎn)品，而且積極參與了標(biāo)準(zhǔn)的制定工作。
一、檢測原理
在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下，膽堿酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物（碘化硫代乙酰膽堿ATCI或碘化硫代丁酰膽堿BTCI）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑（二硫代二硝基苯甲酸DTNB）發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計或農(nóng)殘測試儀在412nm處測定吸光度的變化值（△A），計算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的存在。
對于酶抑制率法來說，膽堿酯酶制劑是最為關(guān)鍵的因素，其質(zhì)量技術(shù)水平?jīng)Q定了檢測的靈敏度、穩(wěn)定性和可靠性。膽堿酯酶制劑的研發(fā)工作一直是本公司的重點，我們研究了大量的酶源材料，在提取方法和保持酶活性穩(wěn)定技術(shù)等方面也積累了豐富的經(jīng)驗，是目前國內(nèi)唯一可以根據(jù)客戶需求，生產(chǎn)不同靈敏度和活性的液體酶制劑的生產(chǎn)廠家，產(chǎn)量和質(zhì)量都一直處于國內(nèi)領(lǐng)先水平，其中比較有代表性的產(chǎn)品如下：

農(nóng)殘速測試劑 按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003配制 500份裝/套
緩 沖 劑 10包 每包加500mL蒸餾水或純凈水溶解 常溫存放
膽堿酯酶 10瓶 不用配制，直接取用 4℃冰箱保存 每份加100μL
顯 色 劑 2瓶 加25mL緩沖液溶解 4℃冰箱保存 每份加100μL
底 物 4瓶 加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解 4℃冰箱保存 每份加100μL
或者加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解 4℃冰箱保存 每份加20μL
酶 活 力 空白對照1分鐘吸光度變化值(ΔΑ0）在0.15-0.3之間。

使用方法：請按照國家標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T 5009.199-2003操作，或根據(jù)農(nóng)藥殘留測試儀的使用說明進行測試。
1、使用方法
取2g果蔬樣品（塊莖類取4g)，葉菜剪成1cm左右見方的碎片，塊莖類取橫截面樣品或取其表皮，放入三角瓶中，加入10mL緩沖液，振蕩1～2min ，倒出提取液，靜置2min，待測。若提取液混濁或雜質(zhì)太多可過濾后再測。
2、測試
對照測試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液，再分別加入100μL酶液和顯色劑，混勻，靜置反應(yīng)10min后加入100μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，及時放入儀器的測量室第1通道，合上蓋。按〈B〉鍵，顯示屏下方延遲10s后，測量時間開始倒計時180s，計時完畢，顯示屏顯示吸光度增量及抑制率。在進行對照測試時，2～8通道可同時進行樣品測試。
樣品測試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測液，再分別加入100μL酶液和顯色劑，混勻，靜置反應(yīng)10min后加入100μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，及時放入儀器的測量室通道，合上蓋。按〈M〉鍵，顯示屏下方延遲10s后，測量時間開始倒計時180s，計時完畢，顯示屏顯示吸光度增量及抑制率。數(shù)據(jù)自動保存，如有需要按〈P〉鍵打印。
3、結(jié)果判定
以分光光度計測試(412 nm波長)時，按下式計算抑制率：
抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt )/ΔΑ0]×100
以農(nóng)藥殘留快速測試儀檢測時其抑制率一般可自動計算。若樣品抑制率≥50%，表示樣品農(nóng)殘超標(biāo)，為陽性結(jié)果。陽性結(jié)果的樣品需做2次以上重復(fù)檢測，多次檢測仍呈陽性需用氣相色譜等儀器做進一步確認。
二、檢測靈敏度
由于采用的標(biāo)準(zhǔn)方法的不同，取樣量、檢測程序和判定標(biāo)準(zhǔn)也有所不同，如國標(biāo)法以抑制率≥50%判定為陽性，而農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)則以抑制率≥70%判定為陽性。我們進行了大量的對比實驗，發(fā)現(xiàn)在實際檢測中，兩種方法的最終檢測靈敏度還是基本一致的。我們用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液對農(nóng)殘速測試劑的最低檢測限進行了多次測試，并通過了中國廣州分析測試中心和農(nóng)業(yè)部蔬菜水果質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心(廣州)等專業(yè)檢驗機構(gòu)的檢測驗證，結(jié)果如下：

農(nóng)殘速測試劑對幾種常見農(nóng)藥的最低檢測限(mg/kg)
農(nóng)藥名稱 最低檢測限 農(nóng)藥名稱 最低檢測限 農(nóng)藥名稱 最低檢測限
敵敵畏 0.01 毒死蜱 0.5 滅多威 0.1
好年冬 0.05 馬拉硫磷 0.5 敵百蟲 0.1
辛硫磷 0.1 樂果 1.0 呋喃丹 0.05
甲胺磷 0.2 氧化樂果 0.6 對硫磷 0.4


注：在實際生產(chǎn)過程中，最低檢測限可能會隨產(chǎn)品種類和酶活性的變化而有所波動，并可以根據(jù)客戶的具體需求做出調(diào)整。
三、保存條件及保質(zhì)期
本公司的農(nóng)殘速測試劑穩(wěn)定性較好，可以常溫運輸或郵寄，長期存放應(yīng)在4℃冰箱中，保質(zhì)期為12個月；室溫或常溫保存時，保質(zhì)期為3～6個月。
四、注意事項
1、任何試劑使用時，用一瓶打開一瓶，用完后才使用新的，防止試劑變質(zhì)。
2、酶、底物和顯色劑碰到一起會馬上發(fā)生生化反應(yīng)，移液器和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽，單獨使用，以免交叉污染。
3、從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶。
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