本試劑盒包括在尿液、血清樣品中酶免定量分析檢測(cè)β興奮劑所需的試劑以及程序說(shuō)明。
本試劑盒檢測(cè)樣本的數(shù)量:96孔(含標(biāo)準(zhǔn)孔)
檢測(cè)所需時(shí)間: 20分鐘
1 概述
β興奮劑是一種人和獸醫(yī)作為治療哮喘的藥物。在牲畜中超劑量使用可以脂肪組織轉(zhuǎn)化為肌肉組織,由于能夠顯著改善脂肪率和生產(chǎn)效率,β興奮劑往往被濫用于畜牧養(yǎng)殖生產(chǎn)中。近年來(lái)已經(jīng)有克倫特羅、沙丁胺醇或其他β興奮劑中毒的病例報(bào)道。本方法采用酶聯(lián)免疫一步分析法,可以在短時(shí)間內(nèi)大量檢測(cè)生物樣本中的β興奮劑,對(duì)于尿液、血清樣本不需要進(jìn)行分析前的預(yù)處理。
2 使用領(lǐng)域
本試劑盒適用于定量檢測(cè)人和牲畜的尿液、血液樣本中的β興奮劑。
3 檢測(cè)原理
反應(yīng)在已包被有β興奮劑多抗的塑料微孔中進(jìn)行,將標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、酶標(biāo)物加入微孔,溫浴時(shí),游離的和酶標(biāo)記的β興奮劑競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合β興奮劑抗體的結(jié)合位點(diǎn)。所有未反應(yīng)的酶標(biāo)物在洗滌步驟中被清除,結(jié)合了的酶可以由顯色劑顯示出來(lái),因?yàn)槊缚梢允篃o(wú)色的顯色劑轉(zhuǎn)變成蘭色,反應(yīng)終止液的加入則可以使蘭色變成黃色,吸收值可以在450nm處進(jìn)行測(cè)定。顏色變化的程度反映樣品中β興奮劑的含量。
4 提供的試劑
4.1 微孔板:96孔(12條×8孔)包被有β興奮劑多抗
4.2 酶標(biāo)物(過(guò)氧化物酶-β興奮劑偶聯(lián)物): 1瓶,凍干粉(使用前用12mL酶標(biāo)物溶解液溶解靜置至少4小時(shí)或者2~6℃過(guò)夜)
4.3 酶標(biāo)物溶解液:1瓶13mL
4.4 洗滌液:10×,1瓶50mL
4.5 顯色劑:1瓶13mL
4.6 反應(yīng)終止液:1瓶13mL
4.7 樣品稀釋液:1瓶 40mL
4.8 克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液:0.5mL 100ppb (另可根據(jù)需要提供相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)品)
5 特異性
β興奮劑ELISA試劑盒的特異性是通過(guò)與相應(yīng)的物質(zhì)進(jìn)行交叉反應(yīng)試驗(yàn)來(lái)確定的,結(jié)果如下:
Compound
Concentration Resulting in 50% Inhibition
( ng/mL)
Cross-Reactivity
(%)
Clenbuterol
1.3
192.3
salbutamol
1.5
166.7
Terbutaline
2.5
100.0
Cimeterol
4.1
61.0
Ractopamine
4800.0
0.05
Nadalol
21.0
11.9
Metaproterenol
12.0
20.8
D,L Propanolol
210.0
1.2
(-) Isoproterenol
16.0
15.6
Oxporenolol
Acebutolol
130.0
1.9
Atenolol
230.0
1.1
(+) Isoproterenol
(+/-) Metoprolol
330.0
0.8
Metaraminol
10000.0
0.03
Labetalol
8000.0
Fenoterol
Ritrodine
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