人多能干細(xì)胞消化液

產(chǎn)品基本信息

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人多能干細(xì)胞消化液是埃澤思生物科技有限公司（Applied Cell^?）自主研發(fā)的一款不含蛋白消化酶、專業(yè)應(yīng)用于人多能干細(xì)胞消化傳代的產(chǎn)品。本產(chǎn)品為溫和高效型消化液，最大限度減少對(duì)干細(xì)胞消化損傷，傳代存活率高，且消化時(shí)間3-5min即可，和傳統(tǒng)細(xì)胞傳代方法相比，簡(jiǎn)化細(xì)胞傳代過(guò)程。本產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程遵循ISO9001體系,并符合GMP指導(dǎo)原則。

產(chǎn)品特性

l 溫和高效，傳代存活率高。

l 簡(jiǎn)化細(xì)胞傳代過(guò)程，省去挑克隆的操作。

相關(guān)產(chǎn)品

人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001000）

Advance人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001001）

人多能干細(xì)胞分化培養(yǎng)基（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001002）

即用型基質(zhì)膠（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001007）

Serum-Free干細(xì)胞凍存液（Applied Cell^?: Cat. no.AC-1001012）

操作方法（此次操作以6孔板為例）

1） 清洗：準(zhǔn)備預(yù)傳代細(xì)胞，貼邊緩慢加入預(yù)熱2 mL PBS緩沖液并輕輕晃動(dòng)，然后沿培養(yǎng)皿邊緣吸去PBS緩沖液。

2） 消化：在6孔板中加入2 mL消化液使之覆蓋皿底，并置于CO₂培養(yǎng)箱中孵育2~5 min；

注意：細(xì)胞密度不同，消化時(shí)間略有調(diào)整，在顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣以及克隆內(nèi)部細(xì)胞間出現(xiàn)間隙，即刻吸掉消化液停止消化。

3）吹打：吸掉人多能干細(xì)胞消化液后，立刻加入平衡好的 2mL干細(xì)胞培養(yǎng)基，用移液槍呈扇形吹打6孔板底，吹吸次數(shù)保持在3~5次，使皿底貼附的干細(xì)胞集落脫落，輕柔緩慢吹吸混勻，制成干細(xì)胞懸液，并將其轉(zhuǎn)移到15mL離心管中；

注意：吹打細(xì)胞要輕柔，吹打次數(shù)在3~5次為宜，盡量避免形成單細(xì)胞。如有少量細(xì)胞無(wú)法從皿底脫落，屬于正常現(xiàn)象。如有大量細(xì)胞無(wú)法從皿底脫落，需延長(zhǎng)消化時(shí)間。

4）干細(xì)胞消化后，可以繼續(xù)進(jìn)行傳代接種，也可以將干細(xì)胞進(jìn)行凍存，步驟如下：

接種：1000 rpm/min離心3 min，棄上清，用室溫平衡好的干細(xì)胞培養(yǎng)基緩吹打重懸細(xì)胞5-10次，并轉(zhuǎn)移至包被好的培養(yǎng)板中，每孔2ml培養(yǎng)基。接種后顯微鏡下觀察干細(xì)胞密度以及細(xì)胞團(tuán)塊大小，一般4個(gè)細(xì)胞以上的團(tuán)塊較合格，水平十字輕輕晃動(dòng)6孔板，使細(xì)胞分布均勻。并置于CO₂恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，第2天觀察細(xì)胞貼壁情況，每24h換液一次。

凍存：1000 rpm/min離心3 min，棄上清，加入2mL Serum-Free干細(xì)胞凍存液（AC-1001012），重懸3~5次后，將其加入到2mL凍存管中（注意：凍存液即用即拿，及時(shí)放回4℃冰箱。）。在凍存管上標(biāo)記凍存細(xì)胞種類、時(shí)間、操作者及細(xì)胞批次，凍存管置于-80℃冰箱過(guò)夜，24h后將其轉(zhuǎn)至于液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。

質(zhì)量控制