為了保證血細(xì)胞計(jì)數(shù)的精密度和準(zhǔn)確性，除核心的檢測系統(tǒng)外，在血細(xì)胞分析儀上應(yīng)用了多種分析技術(shù)及計(jì)算機(jī)技術(shù)，下面介紹幾項(xiàng)血細(xì)胞分析儀的常用技術(shù)。
(一)鞘流技術(shù)
為了使細(xì)胞在檢側(cè)時(shí)呈單排通過檢測系統(tǒng)，避免計(jì)數(shù)中血細(xì)胞從小孔邊緣處注人及湍流，發(fā)明了鞘流技術(shù)。具體方法為:用一毛細(xì)管對準(zhǔn)小孔管，細(xì)胞單純懸液從毛細(xì)管噴嘴中噴出，同時(shí)與四周流出的鞘液一起流過敏感區(qū)，保證細(xì)胞懸液在中間形成一單個(gè)排列的細(xì)胞液，四周被鞘液圍繞。
(二)浮動(dòng)界標(biāo)技術(shù)
紅細(xì)胞和血小板共用一個(gè)小孔管進(jìn)行檢測，在測定正常標(biāo)本時(shí)，紅細(xì)胞和血小板體積相差較大，可以得到正確的分析結(jié)果。但在某些病理情況下可能有大血小板超過了規(guī)定的35n界限，則必然將大血小板漏計(jì)，使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果偏低;反之如果紅細(xì)胞體積偏小(如缺鐵性貧血、地中海性貧血)，則可能將小紅細(xì)胞誤計(jì)為血小板。CPU對血小板和紅細(xì)胞體積分布圖進(jìn)行分析，將血小板計(jì)數(shù)的上限閉值判定線放在紅細(xì)胞和血小板體積分布圖交叉部分的最低處計(jì)數(shù)。sloidwr
(三)擬合曲線技術(shù)
血小板計(jì)數(shù)時(shí)，為了排除Zn以下電子背景與雜質(zhì)干擾和20n以上小紅細(xì)胞和其他小細(xì)胞對血小板計(jì)數(shù)的干擾，庫爾特公司設(shè)計(jì)直接計(jì)數(shù)2一20fl范圍內(nèi)的血小板，然后再根據(jù)正常人血小板體積分布符合對數(shù)正態(tài)分布的理論，通過O一70fl的電子擬合曲線將沒有被直接計(jì)入的血小板間接計(jì)人總數(shù)內(nèi)，這樣使血小板計(jì)數(shù)既少受干擾，又可能將標(biāo)本中的大血小板或小血小板通過擬合計(jì)數(shù)在內(nèi)。
(四)掃流技術(shù)
由于血小板和紅細(xì)胞同在一個(gè)計(jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)，紅細(xì)胞在經(jīng)過小孔后若發(fā)生回流，只要稍微觸及小孔感應(yīng)區(qū)，電極就叮能感應(yīng)到相當(dāng)于血小板大小的小脈沖，使血小板計(jì)數(shù)假性升高。掃流技術(shù)是在小孔的后側(cè)安裝一個(gè)穩(wěn)定的液流裝置，這樣可以使計(jì)數(shù)后的紅細(xì)胞立即被沖走，消除可能的回流對血小板計(jì)數(shù)的影響。
(五)防反流裝置
為了防止被計(jì)數(shù)的紅細(xì)胞又返回到感應(yīng)區(qū)，觸及敏感區(qū)，在小孔的內(nèi)側(cè)安裝一塊帶孔的擋板，板上小孔的直徑比紅細(xì)胞計(jì)數(shù)孔略大，正好位于計(jì)數(shù)孔的后方。當(dāng)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，由于負(fù)壓的作用細(xì)胞快速通過小孔感應(yīng)區(qū)并穿過擋板小孔，即使擋板外側(cè)產(chǎn)生渦流，紅細(xì)胞也會(huì)被阻擋在感應(yīng)區(qū)之外，不影響血小板計(jì)數(shù)。
(六)血小板延時(shí)計(jì)數(shù)
細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)標(biāo)本的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果明顯降低，如<67x10^9/L，且紅細(xì)胞計(jì)數(shù)>1.0/ 10^12/L時(shí)，血細(xì)胞分析儀會(huì)自動(dòng)延長計(jì)數(shù)時(shí)間，保證達(dá)到一定的血小板統(tǒng)計(jì)量，提高計(jì)數(shù)準(zhǔn)確度，減少統(tǒng)計(jì)學(xué)誤差。
(七)三次計(jì)數(shù)
為了得到準(zhǔn)確可靠的計(jì)數(shù)結(jié)果，血細(xì)胞分析儀對主要參數(shù)如WBC、RBC、PLT和MPV四項(xiàng)均做3次重復(fù)計(jì)數(shù)。若3次計(jì)數(shù)結(jié)果的離散度在一定范圍內(nèi)，則取3次計(jì)數(shù)的平均值報(bào)告結(jié)果;若有其中一次計(jì)數(shù)與另兩次相差偏大，則該次計(jì)數(shù)被賦予警報(bào)，只報(bào)告另兩次計(jì)數(shù)的平均值;若3次計(jì)數(shù)結(jié)果均相差大，則無結(jié)果(包括數(shù)據(jù)及直方圖)報(bào)出。
(八)重.校正
細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，理想狀態(tài)是讓細(xì)胞一個(gè)個(gè)通過小孔。但是紅、白細(xì)胞的直徑平均為7一10 um，大者也只有20um左右，而小孔直徑有100urn。實(shí)際計(jì)數(shù)時(shí)會(huì)有兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞重疊在一起同時(shí)經(jīng)過計(jì)數(shù)孔，這種情況產(chǎn)生的脈沖幅值比單個(gè)細(xì)胞要大，但只能產(chǎn)生一個(gè)脈沖，導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)假性降低而體積值假性升高，這種現(xiàn)象稱為重合損失。出現(xiàn)重疊的概率與細(xì)胞濃度、孔徑和液體流速有關(guān)，為了彌補(bǔ)這種損失，庫爾特公司通過專利的邏輯電流校正這類重疊，以保證計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
(九)脈沖編輯
由于計(jì)數(shù)孔直徑明顯大于所檢測細(xì)胞的體積，計(jì)數(shù)過程中當(dāng)細(xì)胞通過小孔的電阻感應(yīng)區(qū)時(shí)，不會(huì)所有的細(xì)胞都在中心區(qū)通過，由于路徑不同，產(chǎn)生的脈沖會(huì)有所變化，對體積測量構(gòu)成影響。采用脈沖編輯技術(shù)來修正這種影響，以得到正確的細(xì)胞計(jì)數(shù)及體積測定結(jié)果。
(十)高精度分析
為了達(dá)到細(xì)胞體積分析的高分辨率和高精度，絕大多數(shù)血細(xì)胞分析儀設(shè)計(jì)在35~45Ofl范圍內(nèi)，分256個(gè)通道分析白細(xì)胞，有的設(shè)計(jì)了512個(gè)通道;在36~3600范圍內(nèi)，分256個(gè)通道分析紅細(xì)胞;在2~20fl范圍內(nèi)，分64個(gè)通道分析血小板，使細(xì)胞體積分析達(dá)到最佳效果，提供出準(zhǔn)確的細(xì)胞體積分布直方圖。
(十一)燃燒電路
該電路能灼燒小孔，自動(dòng)清潔囤積在計(jì)數(shù)小孔的蛋白質(zhì)，防止計(jì)數(shù)小孔堵塞。
(十二)延長計(jì)數(shù)
當(dāng)所計(jì)數(shù)的細(xì)胞少于界定的數(shù)量時(shí)，計(jì)數(shù)器會(huì)自動(dòng)延長計(jì)數(shù)時(shí)間，即重復(fù)計(jì)數(shù)，以保證相當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)數(shù)，減少統(tǒng)計(jì)學(xué)誤差，確保報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度。
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